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Easy-Lowry蛋白定量試劑盒說(shuō)明書
更新時(shí)間:2020-08-17 點(diǎn)擊量:1817

 

Easy-Lowry蛋白定量試劑盒說(shuō)明書

Easy-Lowry Protein Assay Kit

Easy-Lowry蛋白定量試劑盒

 

目錄號(hào):K2341

保存:BSA 標(biāo)準(zhǔn)品:2-8℃

       其  它 組  分:室  溫

 

 

組分說(shuō)明

 

Cat. No.                    K2341

Kit Size                    1000 次/微孔,50 次/試管

試劑 A                        50 ml

試劑 B                        25 ml

BSA 標(biāo)準(zhǔn)品 (2 mg/ml)     2 ml

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

    Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是一種操作簡(jiǎn)便快捷的 Lowry 法蛋白定量試劑盒,可用于多種不同緩沖系統(tǒng)以及各種不同蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)。Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是在 Improved-Lowry 蛋白定量試劑盒基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化改良的產(chǎn)品,其保留了Improved-Lowry 抵抗干擾能力較強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),并進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作步驟,減少了檢測(cè)時(shí)間,并且能得到與mproved-Lowry 蛋白定量接近的定量結(jié)果,其檢測(cè)范圍為 0-2000 μg/ml。

 

注意事項(xiàng)

 

 1.  本產(chǎn)品可以采用分光光度計(jì)(試管檢測(cè)法)或者酶標(biāo)儀(微孔檢測(cè)法)測(cè)定蛋白濃度。

 

 2.  建議每次測(cè)定蛋白樣品時(shí),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。

 

 3.  BSA 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液需與待測(cè)樣品的稀釋液一致(可用 1×PBS 或 0.9%生理鹽水稀釋)。

 

 4.  如待測(cè)樣品中含較多的干擾物質(zhì)(具體見(jiàn)附表 1),可采用 Bradford 法蛋白定量試劑盒(YJ0013)或其他蛋白定量

 

    產(chǎn)品。  

 

 

操作步驟

 

 1.  稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品:用與待測(cè)蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品。

 

 

                                                             

管號(hào)        稀釋液用量(μl)BSA標(biāo)準(zhǔn)品用量(μl)   BSA標(biāo)準(zhǔn)品終濃度(μg/μl)

                                                            

A                  0                 200                       2

B                 200                200                       1

C                 200          200(從B管中取)               0.5

D                 200          200(從C管中取)              0.25

E                 200          200(從D管中取)              0.125

F                200                 0                         0(空白)

 

 2.  稀釋試劑 B:將試劑 B 用去離子水稀釋 8 倍混勻待用。

 

 3.  定量檢測(cè):

 

 3a.  試管檢測(cè)法(蛋白濃度檢測(cè)范圍:0-2 μg/μl)

 

    1)按上表,將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)蛋白樣品(原液或稀釋液)各 200 μl  分別加到作好標(biāo)記的試管中。

 

    2)向各試管中加 1 ml 試劑 A 迅速振蕩混勻,室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。

 

    3)向各試管中加入 4 ml 稀釋過(guò)的試劑 B,迅速在渦旋儀上混勻,室溫靜置 30 分鐘。

 

    4)用分光光度計(jì)測(cè)定 750 nm 下的吸光度值。

 

    5)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蛋白濃度。

 

 3b.  微孔檢測(cè)法(蛋白濃度檢測(cè)范圍:0-2 μg/μl)

 

    1)按上表,將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)蛋白樣品(原液或稀釋液)各 5 μl 分別加到作好標(biāo)記的 96 孔板微孔中。

 

    2)向各微孔中加 50 μl 試劑 A,迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻,室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。

 

    3)向每孔中加入 200 μl 稀釋過(guò)的試劑 B,迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻,室溫靜置 30 分鐘。

 

    4)用酶標(biāo)儀測(cè)定 750 nm 下的吸光值。

 

    5)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蛋白濃度。

 

注意:

 

  1)建議以去除背景值后的吸光值讀數(shù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 

  2)由于操作誤差導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品讀數(shù)嚴(yán)重偏離線性曲線的應(yīng)舍去。

 

  3)未知樣品濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中計(jì)算得出,  實(shí)際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。

 

  4)如果得到的蛋白濃度不在檢測(cè)范圍內(nèi),請(qǐng)重新稀釋樣品后再次測(cè)定。  

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

蛋白雙向(2-D)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh)

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測(cè)

動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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