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Easy-Lowry蛋白定量試劑盒說(shuō)明書
Easy-Lowry Protein Assay Kit
Easy-Lowry蛋白定量試劑盒
目錄號(hào):K2341
保存:BSA 標(biāo)準(zhǔn)品:2-8℃
其 它 組 分:室 溫
組分說(shuō)明
Cat. No. K2341
Kit Size 1000 次/微孔,50 次/試管
試劑 A 50 ml
試劑 B 25 ml
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品 (2 mg/ml) 2 ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是一種操作簡(jiǎn)便快捷的 Lowry 法蛋白定量試劑盒,可用于多種不同緩沖系統(tǒng)以及各種不同蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)。Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是在 Improved-Lowry 蛋白定量試劑盒基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化改良的產(chǎn)品,其保留了Improved-Lowry 抵抗干擾能力較強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),并進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作步驟,減少了檢測(cè)時(shí)間,并且能得到與mproved-Lowry 蛋白定量接近的定量結(jié)果,其檢測(cè)范圍為 0-2000 μg/ml。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品可以采用分光光度計(jì)(試管檢測(cè)法)或者酶標(biāo)儀(微孔檢測(cè)法)測(cè)定蛋白濃度。
2. 建議每次測(cè)定蛋白樣品時(shí),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。
3. BSA 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液需與待測(cè)樣品的稀釋液一致(可用 1×PBS 或 0.9%生理鹽水稀釋)。
4. 如待測(cè)樣品中含較多的干擾物質(zhì)(具體見(jiàn)附表 1),可采用 Bradford 法蛋白定量試劑盒(YJ0013)或其他蛋白定量
產(chǎn)品。
操作步驟
1. 稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品:用與待測(cè)蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品。
管號(hào) 稀釋液用量(μl)BSA標(biāo)準(zhǔn)品用量(μl) BSA標(biāo)準(zhǔn)品終濃度(μg/μl)
A 0 200 2
B 200 200 1
C 200 200(從B管中取) 0.5
D 200 200(從C管中取) 0.25
E 200 200(從D管中取) 0.125
F 200 0 0(空白)
2. 稀釋試劑 B:將試劑 B 用去離子水稀釋 8 倍混勻待用。
3. 定量檢測(cè):
3a. 試管檢測(cè)法(蛋白濃度檢測(cè)范圍:0-2 μg/μl)
1)按上表,將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)蛋白樣品(原液或稀釋液)各 200 μl 分別加到作好標(biāo)記的試管中。
2)向各試管中加 1 ml 試劑 A 迅速振蕩混勻,室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。
3)向各試管中加入 4 ml 稀釋過(guò)的試劑 B,迅速在渦旋儀上混勻,室溫靜置 30 分鐘。
4)用分光光度計(jì)測(cè)定 750 nm 下的吸光度值。
5)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蛋白濃度。
3b. 微孔檢測(cè)法(蛋白濃度檢測(cè)范圍:0-2 μg/μl)
1)按上表,將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)蛋白樣品(原液或稀釋液)各 5 μl 分別加到作好標(biāo)記的 96 孔板微孔中。
2)向各微孔中加 50 μl 試劑 A,迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻,室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。
3)向每孔中加入 200 μl 稀釋過(guò)的試劑 B,迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻,室溫靜置 30 分鐘。
4)用酶標(biāo)儀測(cè)定 750 nm 下的吸光值。
5)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蛋白濃度。
注意:
1)建議以去除背景值后的吸光值讀數(shù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2)由于操作誤差導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品讀數(shù)嚴(yán)重偏離線性曲線的應(yīng)舍去。
3)未知樣品濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中計(jì)算得出, 實(shí)際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。
4)如果得到的蛋白濃度不在檢測(cè)范圍內(nèi),請(qǐng)重新稀釋樣品后再次測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
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